皮肤性病

重楼:黑素瘤治疗的新选择?

作者:佚名 来源:中华皮肤科杂志 日期:2018-01-09
导读

          肿瘤细胞在代谢上表现出较强的糖酵解活性,丙酮酸激酶是糖酵解过程中的重要代谢酶之一,研究表明,丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)的高表达与黑素瘤患者的预后负相关。重楼是中医治疗肿瘤的常用药物之一,其有效成分重楼皂苷Ⅰ对多种细胞增殖具有抑制作用,但对黑素瘤细胞作用如何目前尚不清楚。

关键字:  黑素瘤 

        肿瘤细胞在代谢上表现出较强的糖酵解活性,丙酮酸激酶是糖酵解过程中的重要代谢酶之一,研究表明,丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)的高表达与黑素瘤患者的预后负相关。重楼是中医治疗肿瘤的常用药物之一,其有效成分重楼皂苷Ⅰ对多种细胞增殖具有抑制作用,但对黑素瘤细胞作用如何目前尚不清楚。龙剑文等观察了重楼皂苷Ⅰ对黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响,以及对Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、PKM2蛋白表达的影响。

        采用CCK8法测定0(对照组)、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞和A375细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测A375细胞周期变化及细胞凋亡水平;荧光染料(DCFH-DA)测定A375细胞内活性氧的变化;罗丹明123染色测定线粒体膜电位变化;利用分光光度法检测重楼皂苷Ⅰ处理后A375细胞内ATP和上清液中乳酸、葡萄糖含量;Western印迹法检测A375细胞内Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3、细胞周期蛋白D1、丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)表达。在工作浓度内重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞增殖无明显影响,但能明显抑制 A375 细胞的增殖(P < 0.01);荧光显微镜下发现,重楼皂苷Ⅰ处理后 A375 细胞出现明显的凋亡形态。0(对照组)、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ分别处理A375细胞后,随重楼皂苷Ⅰ浓度增加,细胞凋亡率(分别为4.25% ± 1.27%、10.03% ± 1.49%、36.62% ± 1.97%、44.11% ± 2.47%)逐渐升高(F = 665.7,P < 0.01),G0/G1期细胞比例(分别为54.13% ± 2.57%、67.35% ± 3.79%、74.39% ± 3.29%、82.29% ± 3.99%)亦渐增多(F = 71.81,P < 0.01);细胞内活性氧呈明显上升趋势,细胞线粒体膜电位呈明显下降趋势(P < 0.01);细胞内ATP含量下降(P < 0.01),培养液中乳酸含量下降,葡萄糖含量上升(P < 0.01);细胞Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达增多,但Cyclin D1、Bcl⁃2和PKM2蛋白表达下降(P < 0.01)。

        重楼皂苷Ⅰ可能通过激活细胞内活性氧的产生,引起线粒体膜电位下降,诱导A375细胞凋亡,并通过抑制PKM2、细胞周期蛋白D1表达,使细胞阻滞于G0/G1期。

分享:

评论

我要跟帖
发表
回复 小鸭梨
发表

copyright©医学论坛网 版权所有,未经许可不得复制、转载或镜像 京ICP证120392号 京公网安备11010502031486号

京卫网审[2013]第0193号

互联网药品信息服务资格证书:(京)-经营性-2012-0005

//站内统计 //百度统计 //站长统计
*我要反馈: 姓    名: 邮    箱: